三叶青乙酸乙酯提取物对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

2022-05-26 15:07:12


三叶青属葡萄科崖爬藤属植物,主要分布于长江以南各地,生于阴湿山坡、山沟或溪谷旁林下,以块根或全草入药,具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛等功效[1],临床多用于治疗小儿高热惊厥、肺炎等症,现常用来防治各类肿瘤。为探讨三叶青抗肿瘤作用的机制,更好的开发和利用三叶青,本实验研究了三叶青乙酸乙酯提取物对Lewis肺癌小鼠肿瘤的抑制作用,并探讨其作用机制。

本研究小组成员丁刚强等[2]前期实验研究发现:三叶青提取物对人肝癌细胞HepG2活性具有较强的抑制作用,且以乙酸乙酯提取物的作用为最强。笔者选用乙酸乙酯提取三叶青有效成分进行动物体内的抗肺癌移植瘤的研究,并进一步研究其作用机制。

部分中药具有抗肿瘤作用已得到公认,但具体的作用机制还在进一步的研究中。凋亡是目前比较公认的一个重要机制,是一个基因调控的程序性细胞死亡过程,其中Bcl-2家族蛋白及caspase家族蛋白酶在细胞凋亡中发挥着重要的作用。Bcl-2家族中最具代表性的是抑制凋亡蛋白Bcl-2和促进凋亡蛋白Bax。Bcl-2基因蛋白家族形成的通道是线粒体凋亡途径的主要调节因子[3]Bcl-2基因产物主要定位在线粒体膜、核模及内质网上,细胞凋亡减弱时,Bcl-2表达增强;反之,细胞凋亡增强时,Bcl-2表达减弱。以单体形式存在于胞质的Bax在受到凋亡刺激时构象发生变化,导致Bax寡聚体形成并整合到线粒体外膜上,使线粒体外膜通透性增加,使游离的cyt-c释放至胞质,然后通过激活一系列下游基因,促进下游caspases酶的活化来促进凋亡[4,5]。Bax基因不但直接促进细胞凋亡,而且有拮抗Bcl-2的抑制凋亡作用[6,7]。caspase家族以非活性的蛋白酶形式存在于细胞质中,当它们被激活后,蛋白酶分解并按照一定的顺序逐级活化或灭活,从而引起细胞凋亡。其中caspase-3被认为是细胞凋亡蛋白酶级联反应的必经之路,在细胞凋亡过程中则处于中心地位,是细胞凋亡的主要效应因子[8,9]。因此,笔者选择Bcl-2、Bax、caspase-3作为研究对象,研究三叶青抗肿瘤的机制。

研究显示三叶青能促进Bax mRNA的表达,降低Bcl-2 mRNA的表达,但没有增强caspase-3 mRNA的表达,可能是因为存在其他途径作用于caspase-3mRNA的表达。另外三叶青虽然没有改变caspase-3 mRNA的表达,但增强了其蛋白的表达,提示三叶青可能作用于其蛋白质翻译的某个环节,具体机制有待进一步研究。

本研究结果显示,三叶青乙酸乙酯提取物能明显抑制肿瘤细胞的生长,促进肿瘤细胞的坏死及凋亡,进一步的研究显示三叶青可能通过提高Bax、caspase-3的表达,降低Bcl-2的表达来发挥其促凋亡的抗肿瘤作用。

参考文献:

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